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新引进苹果抗重茬砧木组培快繁体系研究

发布时间:2019-12-20 17:19所属平台:学报论文发表浏览:

矮化自根砧一般由无性繁殖而来,一般采取扦插、压条等传统手段。但对于一些苹果砧木来说,扦插不易生根,难成苗,且插条需求量大,繁育系数低;而压条虽然能成苗,但繁育过程中需要多次培植,对培植高度和材料配比都有要求,分株起苗时还易对苗木根系造成伤害

  矮化自根砧一般由无性繁殖而来,一般采取扦插、压条等传统手段‍‌‍‍‌‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‍‍‌‍‌‍‌‍‌‍‍‌‍‍‍‍‍‍‍‍‍‌‍‍‌‍‍‌‍‌‍‌‍。但对于一些苹果砧木来说,扦插不易生根,难成苗,且插条需求量大,繁育系数低;而压条虽然能成苗,但繁育过程中需要多次培植,对培植高度和材料配比都有要求,分株起苗时还易对苗木根系造成伤害,影响缓苗成活,繁殖系数相对较差‍‌‍‍‌‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‍‍‌‍‌‍‌‍‌‍‍‌‍‍‍‍‍‍‍‍‍‌‍‍‌‍‍‌‍‌‍‌‍。与扦插、压条相比,利用组织培养技术繁育自根苗具有繁殖周期短、繁殖系数高、苗木整齐等优点。

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  因此,组织培养成为高效繁育自根砧苗的重要途径。抗重茬砧木“AM1”(暂定名)扦插难生根,利用组培技术不仅可有效降低苹果病害,短时间内供应大量优良苗木,满足市场需求。组培苗增殖与生根是组培快繁技术的关键步骤,能否生根及生根好坏直接影响成苗。本试验以新引进抗重茬砧木“AM1”苹果砧木为材料,研究不同激素浓度配比对其增殖与生根的影响因素,建立组培快繁体系,为生产应用提供大量优质苗木。

  1 材料与方法

  1.1材料 供试材料为从美国引进的抗重茬砧木“AM1”(暂定名),山东省果树研究所提供,试验在山东省泰安惠农园艺科技有限公司进行。

  1.2 方法 按步组培,并在组培不同阶段设置不同浓度的激素处理。

  1.2.1 材料选择 首先挑选生长健壮无病虫危害的G41母树,4—8月份从母树上选取新长出的长1~1.5 cm的茎尖,用自来水冲洗1~2小时后,在超净工作台上先放入盛有75%酒精的烧杯中处理5~7秒,取出后再浸入盛有0.1%升汞的烧杯内,杀菌8分钟,期间轻微晃动3~5次,最后用无菌去离子水充分冲洗3~5遍。

  1.2.2 启动培养 将消毒杀菌清洗后的茎尖接种到启动培养基上,培养基组分为MS+6-BA 1.0 mg/L+ IBA 0.1 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂6.0 g/L,置于光照时间16小时/天、光照度2 000 lx、气温24~26 ℃、空气相对湿度50%~70%的条件下进行培养。

  1.2.3 增殖培养 将启动培养后成活良好的外植体接种到增殖培养基上,培养基组分为MS+6-BA 0.5~1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L +蔗糖30.0 g/L+琼脂6.0 g/L,置于光照时间16小时/天、光照度2 000 lx、温度24~26 ℃、相对湿度40%~50%条件下进行培养。

  1.2.4 生根培养 将增殖培养后获得的生长健壮、高度大于1.5 cm,生长时间为20~25天的组培苗,接种于生根培养基中,培养基组分为1/2 MS+IAA 1.5 mg/L +IBA 0.5 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂6.0 g/L,先暗处理7天后,再置于光照时间16小时/天、光照度2 000 lx、气温25 ℃条件下进行生根培养。

  1.2.5 炼苗 当组培苗根长度达到1.5 cm后开始炼苗,光照度从2 000~5 000 lx逐步过渡,炼苗10~15天。

  1.2.6 移栽 当组培苗根长2 cm左右,且经过炼苗处理后,在遮阴棚内开始第1次移栽,具体是将生根苗从瓶内取出,洗净根部培养基后,移栽到培养盘或培养袋内,培养基质为1/3基质+1/3珍珠岩+1/3粗河沙,棚内装有定时喷淋装置,每天早晚喷淋1次,保持基质和空气湿度,利于缓苗,7天后将培养盘移至棚外;当容器苗新梢长出,有新根从培养袋或培养盘底部透水孔穿出时,移往大田苗木培育圃,采取宽窄行育苗,宽行60 cm,窄行40 cm,株距25 cm,每亩育苗1万株,移栽成活率90%~95%。

  1.2.7 成苗 落叶后出苗,尽量减少对根系的损伤,分级保存。

  2 结果与分析

  2.1 采样时期及外植体灭菌 从表2、表3看出,采样时期越早,成活个数越多,成活率越高,污染率越低,4月10日左右采样成活率最大,为78.33%,污染率最低,为11.67%;采用升汞灭菌,成活率随处理时间延长,呈先升高后降低的趋势,处理8秒,成活率最高,为80%,而污染率随处理时间延长,呈降低趋势,处理10秒最低,为3.33。综合来看,抗重茬砧木AM1适宜采样时间4月10日左右,升汞灭菌时间8秒。

  2.2 启动培养基不同浓度激素处理对外植体萌芽的影响 从表4、表5、表6可看出,启动培养基使用不同浓度6-BA、6-BA+IBA、6-BA+IBA+NAA处理,不同浓度6-BA+IBA+NAA处理,诱导率普遍高于6-BA、6-BA+IBA处理。其中,0.05 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA处理诱导率最高,达到83.33%;6-BA+IBA处理效果普遍高于6-BA处理,其中0.10 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA效果较好,达到76.67%;6-BA处理效果普遍较差,其中1.0 mg/L 6-BA效果较6-BA处理其他浓度好,萌芽率达到70.00%。

  2.3 增殖培养基不同浓度激素处理对幼苗生长的影响 从表7看出,使用0.5 mg/L的6-BA,增殖系数随着IBA浓度增大而增大,IBA浓度0.15 mg/L时增殖系数最大,达到4.15,但砧木苗出现卷叶现象。使用1.0 mg/L的6-BA,增殖系数随着IBA浓度增大,出现先增大后降低的趋势。IBA浓度0.1 mg/L时最大,增殖系数达到5.14,且砧木苗绿色、叶大,生长较好。

  使用1.5 mg/L的6-BA,增殖系数随着IBA浓度增大,出现先降低又升高的趋势。IBA浓度0.15 mg/L时最大,增殖系数达到5.13,但砧木苗出现玻化苗现象。因此增殖培养基最佳激素浓度为1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA。

  2.4 生根培养基不同浓度激素处理对幼苗生根的影响 从表8看出,使用1.0 mg/L的IAA,生根率随着IBA浓度增大而呈先升高后降低趋势,而生根条数呈增大趋势,根长呈先降低后增高的趋势。其中,IBA浓度1.0 mg/L时生根率最高,为94.86;IBA浓度1.5 mg/L时,生根条数最高,为6.86条;IBA浓度0.5 mg/L时,根长最长,为2.12m。

  使用1.5 mg/L的IAA,生根率、生根条数随着IBA浓度增大而降低。其中,IBA浓度为0.5 mg/L时生根率达100%、生根数8.26条;而根长最大值出现在1.0 mg/L的IBA时。

  使用2.0 mg/L的IAA,生根率随着IBA浓度增大而呈降低。其中,IBA浓度为0.5 mg/L时生根率达91.02%,而生根数、根长最大值出现在1.5 mg/L的IBA时,分别为7.48条、2.21 cm。

  3 讨论

  近几年,关于苹果砧木的组培快繁常有报道,许多矮化砧木都成功获得组培苗。苹果砧木组培快繁不同砧木类型所需培养基类型不同,培养基中各种激素浓度配比也不相同。本方法采用MS+6-BA 1.0 mg/L+ IBA 0.1 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂6.0 g/L启动培养基,成活率高达80%以上,可建立有效的组培苗群体。

  采用MS+6-BA 0.5~1 mg/L+IBA 0.1 mg/L +蔗糖30.0 g/L+琼脂6.0 g/L增殖培养基,增殖系数高达5.14。采用1/2 MS+IAA 1.5 mg/L +IBA 0.5 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂6.0 g/L生根培养基,生根率高达100%,根长多超过2 cm,移栽成活率在90%~95%。通过连续启动培养、增殖培养、生根培养和移栽,可实现工厂化育苗,为苹果产业的更新发展提供资源基础。

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《新引进苹果抗重茬砧木组培快繁体系研究》

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